细胞基本属性

细胞名称：UMNSAH/DF-1(鸡胚成纤维细胞)

细胞别称：UMNSAH-DF-1; UMNSAH-DF 1; UMNSAH-DF1; UMNSAH/DF1; UMNSAH/DF#1; DF-1; DF1; Douglas Foster-1

细胞类型：成纤维细胞

生长特性：贴壁

培养条件：DMEM+10% FBS+1% P/S

培养环境：空气，95%；二氧化碳 (CO2)，5%

细胞简介：UMNSAH/DF-1细胞是起源于10日龄的ELL-0鸡蛋的鸡成纤维细胞株，自发永生化。分离的原代鸡胚成纤维细胞在培养液中培养，传代直到衰老，在培养过程中保持细胞在30%到60%密度，不衰老的克隆进行鉴定并传代不少于30次。在软琼脂上没有观察到克隆增殖，说明UMNSAH/DF-1细胞是永生化而没有转化。UMNSAH/DF-1细胞可作为病毒增殖、重组蛋白表达和重组病毒生产的基质。

客户养的UMNSAH/DF-1鸡胚成纤维细胞，现在是第5次传代，这次是1:3传代，用的是上图胰酶1毫升，消化2一3分钟，反馈是此次传代的第2天很多细胞不贴壁，帮忙看一下。

小尚解答

消化时间太长了，该细胞消化时间短，注意控制消化时间及吹打力度。细胞消化至变圆可以轻松吹下时即可终止消化，不能消化至完全漂浮。对于消化这步，客户如果对该细胞经验不多，无法准确掌控胰酶作用时间，建议客户按照下述操作：

胰酶首先复温到室温后加入细胞，放入37度培养箱，然后每隔30秒，即吹打下细胞（此时吹打细胞应尽量轻柔，不能强行将细胞吹下，否则细胞可能出现机械损伤），如果能够吹打散细胞，说明细胞消化完成可以终止消化，如果30秒吹打不下，再等30秒重复操作。消化完成后加3-4ML完全培养基终止消化，混匀细胞，收集细胞悬液900-1000rpm离心3min，弃上清。再加5ml PBS重悬细胞，再离心后，用完全培养基重悬接种到新的培养皿。第二次PBS重悬是为了去除碎片，如果平时碎片比较少，传代时可以省略PBS重悬的步骤；如果碎片很多，建议PBS多洗一次。传代24h后可以观察细胞，若死亡细胞及碎片较多建议PBS润洗下贴壁的细胞，再加新的培养基继续培养。

2.目前细胞活力较差，死细胞偏多，建议静置培养一天看一下，若明天细胞仍然不贴壁就不建议继续培养了。若有保种的冻存细胞可以重新复苏培养。

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【SNL-006】UMNSAH/DF-1(鸡胚成纤维细胞)

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公 司 简 介

武汉尚恩生物技术有限公司坐落于武汉东湖高新区光谷生物城，专注于细胞及系列产品的研发、生产和服务，公司建有标准化GMP实验室、动物房，已整体通过ISO 9001:2015质量管理体系认证，获得高新技术企业、3551人才、瞪羚企业、科技小巨人等多项荣誉。　　

公司主要研发生产细胞系、原代细胞、胎牛血清、基础培养基、完全培养基、辅助试剂等系列产品，提供细胞及培养配套产品一站式采购；细胞库冻存细胞系500余种，同时通过不间断引种细胞扩大丰富细胞种类；公司还提供人源细胞系的STR鉴定、大小鼠的种属鉴定服务等。　　

公司细胞业务覆盖国内各大高校生物实验室、生物研究机构及一些生物科研、诊断、制药公司，不断为广大科研工作者提供最优质的产品和服务！尚恩生物—您专业的细胞供应商！

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