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LNCaP clone FGC细胞平衡后成团严重是什么原因?

人阅读 发布时间:2023-01-09 11:17

细 胞 基 本 信 息

▲LNCaP clone FGC细胞正常生长形态照片

 

细胞名称:LNCaP clone FGC(人前列腺癌细胞)

细胞别称:LNCaP-Clone-FGC; LNCaP.FGC; LNCaP-FGC; LNCaP FGC; LNCAPCLONEFGC; LNCaP-ATCC

细胞货号:SNL-356

培养条件:1640+10% FBS+1% P/S

培养环境:空气,95%;二氧化碳 (CO2),5%

细胞简介:人前列腺癌细胞LNCaP clone FGC是从一位50岁白人男性(血型B+)的左锁骨淋巴结针刺活检中分离,该患者经确诊为前列腺癌转移。LNCaP clone FGC细胞对5-α-二氢睾酮(生长调节子和酸性磷酸脂酶产物)有响应。LNCaP clone FGC细胞并不形成一致的单层,而是形成集落,在传代时可以反复吹吸分散。LNCaP clone FGC细胞仅仅轻轻地吸附在基底上,不形成汇合,很快使培养基变酸。LNCaP clone FGC细胞生长极其缓慢,传代后48小时内不应扰动。当培养瓶包装运输后,多数LNCaP clone FGC细胞从培养瓶底分离,悬浮在培养基中。

操 作 实 例

客户提问:
LNCaP clone FGC细胞收到平衡一晚上,成团严重基本没什么贴壁的怎么处理?

小尚解答:

细胞在运输过程中因温差,震荡,碰撞等原因可能会出现漂浮成团的现象,不用着急,T25表面消毒放入培养箱中平衡2-4h后按以下步骤操作即可恢复贴壁。

 

① 收集所有培养基及漂浮细胞到无菌50ml离心管,1000rpm,5min离心收集细胞沉淀。

② 取培养基上清到4℃保存,用于培养细胞,以平稳过度到客户自己的培养基。在原50ml离心管中加入5mlPBS重悬细胞沉淀,尽量吹散后1000rpm,5min离心,弃上清。

③ 加入1ml胰酶轻轻震荡混匀,勿直接吹打细胞,然后放入培养箱消化2-3min,消化完成后用移液器轻轻吹打几下,吹散细胞后立刻加5ml完培终止消化。1000rpm,5min离心,弃上清。

④ 加入1ml完培重悬细胞接种到新培养瓶中。T25加10-12ml培养基培养,通常2天左右换液一次,若培养基变黄及时换液,以维持一个相对稳定的培养条件,有利于细胞活正常生长。

注意:

原T25剩余贴壁细胞密度大于70%,可以正常消化传代;贴壁细胞较少可以加培养基正常培养至70%密度以上消化传代;若几乎没有细胞则可以丢弃。

若出现传代后次日贴壁较少的情况,可以收集培养基及漂浮细胞到离心管,离心收集未贴壁细胞,然后加新培养基尽量重悬吹散后接种回原培养瓶让细胞继续贴壁,注意小心操作,避免将已贴壁细胞吹下。

由于贴壁较弱细胞消化时间本身较短,必须控制消化时间和吹打力度,避免细胞消化或吹打死亡过多导致无法正常贴壁生长。

 

注 意 事 项
LNCaP clone FGC细胞培养难度相对较高,培养过程注意以下事项:

1.培养基营养不足以及pH值过低时会使细胞活力大幅度下降,建议加足量培养基培养细胞,特别注意培养基变黄后要及时换液;

2.换液时注意不要直接冲击到细胞表面以及过冷的试剂处理细胞,避免细胞回缩脱落;

3.细胞不要长时间高密度培养,70-80%密度左右即可传代,以维持细胞有较好的活性;

4.不要将细胞放置室温过久或经常挪动细胞,尽量让细胞静养。

5.细胞贴壁较弱,培养过程细胞通常呈聚集放射状生长,可能会有部分细胞漂浮生长;

6.建议使用TC表面处理的高贴培养瓶或明胶、多聚赖氨酸等包被的培养瓶培养细胞,有利于细胞贴壁生长。

 

产 /品 /推/ 荐

【SNL-356】LNCaP clone FGC(人前列腺癌细胞)

【SNLM-356】人前列腺癌细胞专用培养基

 

公 司 简 介

www.sunncell.com.cn

武汉尚恩生物技术有限公司坐落于武汉东湖高新区光谷生物城,专注于细胞及系列产品的研发、生产和服务,公司建有标准化GMP实验室、动物房,已整体通过ISO 9001:2015质量管理体系认证,获得高新技术企业、3551人才、瞪羚企业、科技小巨人等多项荣誉。  

公司主要研发生产细胞系、原代细胞、胎牛血清、基础培养基、完全培养基、辅助试剂等系列产品,提供细胞及培养配套产品一站式采购;细胞库冻存细胞系500余种,同时通过不间断引种细胞扩大丰富细胞种类;公司还提供人源细胞系的STR鉴定、大小鼠的种属鉴定服务等。  

公司细胞业务覆盖国内各大高校生物实验室、生物研究机构及一些生物科研、诊断、制药公司,不断为广大科研工作者提供最优质的产品和服务!尚恩生物—您专业的细胞供应商!

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