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SV-HUC-1细胞复苏平衡后怎样判断其状态

人阅读 发布时间:2022-12-19 10:46

细 胞 基 本 信 息

细胞名称:SV-HUC-1(人输尿管上皮永生化细胞)

细胞别称:HUC-1; SV-HUC; SVHUC

细胞类型:上皮细胞

生长特性:贴壁

培养条件:F12K+10% FBS+1% P/S

培养环境:空气,95%;二氧化碳 (CO2),5%

细胞简介:SV-HUC-1细胞是11岁男性的正常输尿管组织用SV40病毒转染建株的,细胞尿上皮角蛋白、SV40 T抗原阳性。SV-HUC-1细胞经反复用非洲绿猴肾细胞平板测试检测传染性SV40,结果都呈阴性,但在胁迫(如曝露于化学试剂)下可能激活SV40病毒。SV-HUC-1细胞可以用于3D细胞培养。

SV-HUC-1细胞正常生长形态照片(40x、100x)

 

SV-HUC-1细胞 操 作 实 例

客户提问:

SV-HUC-1细胞 刚收到的复苏细胞平衡后  麻烦看下状态

小尚回答:

目前从图片上观察细胞状态良好,密度在80%左右,平衡完成后及时消化传代,首次传代建议1:2传代。该细胞消化时间较长,注意延长消化时间。对于消化这步,客户如果对该细胞经验不多,无法准确掌控胰酶作用时间,建议客户按照下述操作:

胰酶首先复温到室温后加入细胞,放入37度培养箱,然后每隔30秒,即吹打下细胞(此时吹打细胞应尽量轻柔,不能强行将细胞吹下,否则细胞可能出现机械损伤),如果能够吹打散细胞,说明细胞消化完成可以终止消化,如果30秒吹打不下,再等30秒重复操作。

消化完成后加3-4ML完全培养基终止消化,混匀细胞,收集细胞悬液900-1000rpm离心3min,弃上清。再加5ml PBS重悬细胞,再离心后,用完全培养基重悬接种到新的培养皿。第二次PBS重悬是为了去除碎片,如果平时碎片比较少,传代时可以省略PBS重悬的步骤;如果碎片很多,建议PBS多洗一次。

传代24h后可以观察细胞,若死亡细胞及碎片较多建议PBS润洗下贴壁的细胞,再加新的培养基继续培养。

注 意 事 项

SV-HUC-1细胞对pH值敏感,注意加多些培养基培养,培养变黄后及时换液。平时培养建议T25瓶加10ml完全培养基,10cm皿加12-15ml,密度60%以下2-3天换液一次,密度60-80%时隔一天换液一次,80%以上每天换液。以维持相对稳定的培养条件。特别是密度高的时候,留意培养基是否变黄,培养基变黄要及时换液。

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公 司 简 介

武汉尚恩生物技术有限公司坐落于武汉东湖高新区光谷生物城,专注于细胞及系列产品的研发、生产和服务,公司建有标准化GMP实验室、动物房,已整体通过ISO 9001:2015质量管理体系认证,获得高新技术企业、3551人才、瞪羚企业、科技小巨人等多项荣誉。  

公司主要研发生产细胞系、原代细胞、胎牛血清、基础培养基、完全培养基、辅助试剂等系列产品,提供细胞及培养配套产品一站式采购;细胞库冻存细胞系500余种,同时通过不间断引种细胞扩大丰富细胞种类;公司还提供人源细胞系的STR鉴定、大小鼠的种属鉴定服务等。  

公司细胞业务覆盖国内各大高校生物实验室、生物研究机构及一些生物科研、诊断、制药公司,不断为广大科研工作者提供最优质的产品和服务!尚恩生物—您专业的细胞供应商!

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