细胞培养基础（一）

相信很多新手朋友都会遇到这种情况，自己培养的细胞养的好好的，突然有一天细胞培养基浑浊了、变黄、飘着一些霉菌团或者显微镜下全是树枝样的霉菌菌丝，起初还只是一两个培养瓶有这种情况，过段时间就大面积都出现这种情况了。出现以上情况的时候，很多刚开始接触细胞培养的人都不知道怎么污染的，更不知道如何处理。那么接下来，小编就带你们看看怎么从环境上降低细胞被污染的概率。



首先我们要知道，造成细胞污染的污染物不是凭空产生的，而是环境或者人为带入的，那么我们就要从环境和个人方面入手。接下来，就让我们详细的了解下具体需要注意哪些事项吧。

1、细胞室应设计合理的通风、缓冲区域。

细胞室的空气要保持清洁，需要对流入的空气进行过滤，防止外界污染通过空气传播。人员进入细胞室，需要经过缓冲室，缓冲室的作用就是避免开门进出时外界的空气直接与细胞室内流通，同时还有另外一个功能，就是人员穿戴实验服、防具的可以在这里进行，避免人体身上灰尘、皮屑等直接进入细胞室。
 

2、细胞室位置避免阳光直射、隔离水源、通风良好。

避免阳光直射，可以直接降低细胞室夏天的空调费用，这个应该没有人有疑问。不过还有另外一个重要原因，我们目前培养的细胞大部分都是37度培养的，所以气温需要维持37度以下，甚至部分国产培养箱需要保持室温30度以下才能正常工作。隔离水源可以避免水池里滋生的各种细菌、真菌等，降低实验室污染概率，切忌图方便将水源引入细胞室，否则管理不善的话很容易出现各种污染的情况。细胞室需要经常保持通风，通风可以降低空气湿度，尤其是南方梅雨季节，降低空气湿度可以减少霉菌滋生的情况。
 

3、细胞室超净台、生物安全柜应摆放合理。

个人装备可以有效的防止人体自身携带的污染物污染细胞，同时也能为实验者提供可靠的防护。

1、换鞋，穿戴实验服、手套、口罩是进入细胞室必备的。

细胞室是洁净的环境，而人体自身会携带诸多污染物进入实验室。换鞋，穿戴实验服、手套、口罩可以很大程度上避免沾染的泥土、灰尘、皮屑、毛发、口腔细菌、支原体所致的污染。
 

2、实验服、手套、口罩可以给实验者提供防护。

有部分细胞是会表达一些病毒的，而且很多细胞都是人体瘤细胞，相信实验者都不想直接接触这些细胞，那么合理使用个人防护道具可以避免直接接触，降低实验者心理压力。
 

三、环境维持

有合理设计的实验室，合理使用个人装备还不够，还需要定期对环境进行维护，扫除漏网之鱼。

 

1、细胞室应定期紫外消毒。
细胞室内应在固定位置安装紫外杀菌灯，通过紫外、臭氧双重作用杀灭可能存在的污染物，保持环境洁净。最好有定时开关，每天晚上人离开实验室后，对实验室进行 1-2 h 的紫外杀菌。
 

2、培养箱应定期清洗消毒。

培养箱是至关重要的一环，一旦污染，不加控制的话，势必造成大面积污染的情况。培养箱建议 1-2 周换水一次，2-3 个月进行一次清洗、整体消毒。如果平时污染比较严重的话，可以缩短消毒周期，避免长时间使用导致污染累积爆发。
 

3、超净台、安全柜每次使用后应擦干净台面、紫外照射。

使用后用 75% 酒精棉擦干净台面，可以保持台面清洁，美观。使用超净台前，一定要紫外杀菌 1-2 h 方可开始实验。
 

4、细胞室地面应定期用消毒液拖地。

地面是污染物最严重的地方，需要经常用 84 消毒液拖地，保持地面清洁。
 

5、各种台面、冰箱内部定期清洗消毒。

这些地方也是容易藏污纳垢的地方，一定要经常用 75% 酒精擦洗干净，保持清洁。
 

好了，今天分享的细胞培养经验就到此为止了，我们下期再见。

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