【常见问题】正确的吹打细胞，您真的会吗？

机械损伤很好理解，这个主要是指枪头刮擦、细胞间碰撞导致的细胞损伤。如果要减少这部分损伤，首先应该尽量减小吹打力度，力度只要保证能够吹下吹散细胞就行。大部分悬浮细胞不需要很大力度吹打即会散开；贴壁细胞一定要消化到细胞可以轻轻吹下再终止消化。千万不要消化不完全就很用力地吹打细胞，这样暴力吹下的细胞往往状态都不会太好。

其次是注意枪头刮擦的问题，枪头与细胞层接触甚至研磨会导致细胞直接死亡。一般新手遇到这种问题比较多，新手刚开始做实验应该靠主动意识控制枪头与培养瓶底间距，避免枪头直接接触瓶底，等时间久了就可以养成良好的习惯了。枪头直接接触瓶底不仅会刮伤细胞，还可能划伤瓶底产生划痕，有划痕的这部分是很难再有细胞生长的。因此实践中不要用有大量划痕的培养瓶培养细胞。

剪切力这个词对大多数人来说是比较陌生的。剪切简单来说就是物体横截面收到外力影响，沿外力方向相对移动的现象，这个外力就叫做剪切力，生活中常见的就是用剪刀剪纸，两片剪刀片相对运动对纸片横截面产生剪切力从而剪断纸张。细胞培养中明显没有剪刀，那剪切力损伤是怎么形成的呢？细胞完全培养基里都是有血清的，而血清中含有大量蛋白质，因此很容易出现气泡。我们都知道气泡一触就破，那么问题就来了：如果培养基里有很多气泡，细胞在气泡与培养基之间，当气泡破碎时，细胞瞬间会受到强大的剪切力影响，很容易直接破碎了。

那怎么减少气泡的产生呢？其实很简单！一是减小吹打力度，力度合适的话就更容易控制培养基流速，避免涡流产生气泡。二是吹打细胞时枪头的的培养基不要打完，不然就很容易打入空气。比如说1ml枪头吸了1ml培养基，最后只打出800-900ul，留一点培养基不打出就可以避免混入空气产生气泡。当然说起来很简单，不过这个还是很看技术的，需要对移液器控制得当才能更好的避免气泡。